分光光度計是將成分復雜的光，分解為光譜線(xiàn)的科學(xué)儀器。測量范圍一般包括波長(cháng)范圍為380~780 nm的可見(jiàn)光區和波長(cháng)范圍為200~380 nm的紫外光區。
 

　　分光光度計的儀器組成：
 

　　分光光度計已經(jīng)成為現代分子生物實(shí)驗室常規儀器。常用于核酸，蛋白定量以及細菌生長(cháng)濃度的定量。
 

　　儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統組成。
 

　　分光光度計的光譜范圍：
 

　　包括波長(cháng)范圍為400~760 nm的可見(jiàn)光區和波長(cháng)范圍為200~400 nm的紫外光區.不同的光源都有其發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。
 

　　鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的400~760nm波長(cháng)的光譜光通過(guò)三棱鏡折射后,可得到由紅橙,黃綠,藍靛,紫組成的連續色譜;該色譜可作為可見(jiàn)光分光光度計的光源。
 

　　氫燈(或氘燈)的發(fā)射光譜:氫燈能發(fā)出185~400 nm波長(cháng)的光譜可作為紫外光光度計的光源。
 

　　如果在光源和棱鏡之間放上某種物質(zhì)的溶液,此時(shí)在屏上所顯示的光譜已不再是光源的光譜,它出現了幾條暗線(xiàn),即光源發(fā)射光譜中某些波長(cháng)的光因溶液吸收而消失,這種被溶液吸收后的光譜稱(chēng)為該溶液的吸收光譜。
 

　　不同物質(zhì)的吸收光譜是不同的.因此根據吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質(zhì)。
 

　　當光線(xiàn)通過(guò)某種物質(zhì)的溶液時(shí)透過(guò)的光的強度減弱.因為有一部分光在溶液的表面反射或分散,一部分光被組成此溶液的物質(zhì)所吸收只有一部分光可透過(guò)溶液。
 

　　入射光=反射光+分散光+吸收光+透過(guò)光。
 

　　如果我們用蒸餾水(或組成此溶液的溶劑)作為"空白"去校正反射,分散等因素造成的入射光的損失則:
 

　　入射光=吸收光十透過(guò)光